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簡(jiǎn)要描述：青旗（上海）生物技術(shù)發(fā)展有限公司，總部位于上海浦東新區(qū)，依托本地高校資源，逐步發(fā)展成為以生物技術(shù)為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓(xùn)為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺(tái)，在標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞庫(kù)建立及細(xì)胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)原代細(xì)胞、細(xì)胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細(xì)胞和HPLC檢測(cè)等科研產(chǎn)品與服務(wù)。我們秉承對(duì)用戶(hù)負(fù)責(zé)的態(tài)度，以對(duì)科研的高度嚴(yán)謹(jǐn)，以嚴(yán)格的質(zhì)量控制，為廣大生物醫(yī)學(xué)科研用戶(hù)提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)！
更新時(shí)間：2021-05-27
廠(chǎng)商性質(zhì)：生產(chǎn)廠(chǎng)家
瀏覽次數(shù)：449
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | BFN608006373 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
細(xì)胞名稱(chēng) | 小鼠表皮細(xì)胞JB6Cl30-7b |
| |
貨物編碼 | BFN608006373 | ||
產(chǎn)品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細(xì)胞數(shù)量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運(yùn)輸方式 | 常溫保溫運(yùn)輸 | 干冰運(yùn)輸 | |
安全等級(jí) | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 2類(lèi) | ||
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡(jiǎn)介 | 小鼠表皮細(xì)胞JB6Cl30-7b細(xì)胞取自ICR小鼠，貼壁培養(yǎng)，不規(guī)則形態(tài)。 | ||
注釋 | 倍增時(shí)間46h。 | ||
STR信息 | / | ||
參考文獻(xiàn) | Frizzled4在小鼠毛囊周期中的表達(dá) , PP. 631-635 陳年,伍津津,邱偉明,唐輝,唐書(shū)謙 Keywords: Frizzled,毛囊,小鼠,Wnt,抗體 Full-Text Cite this paper Add to My Lib
Abstract: 目的探討Wnt蛋白的受體分子Frizzled4在小鼠毛囊周期中的表達(dá)、功能及其意義。方法利用實(shí)時(shí)定量PCR、RT-PCR、Westernblot和免疫熒光等技術(shù)分別檢測(cè)Frizzled4mRNA和蛋白在毛囊生長(zhǎng)期（P1d、P3d、P8d）、退化期（P16d）和靜止期（P21d）中的表達(dá)。免疫熒光技術(shù)檢測(cè)Frizzled4在小鼠皮膚上皮細(xì)胞JB6cl30-7b中的定位，MTT檢測(cè)用抗Frizzled4抗體處理JB6cl30-7b細(xì)胞后的增殖情況。結(jié)果在毛囊生長(zhǎng)期早期，Frizzled4mRNA和蛋白在P1d的小鼠背部皮膚中表達(dá)明顯，膜表達(dá)于Bulge、毛囊外根鞘及毛球外側(cè)。在P3d，Frizzled4蛋白表達(dá)明顯上調(diào)，主要表達(dá)于Bulge、毛囊外根鞘、內(nèi)根鞘、precortex、部分毛球外側(cè)。在生長(zhǎng)中期（P8d），Frizzled4蛋白的表達(dá)*，集中在毛囊Bulge、外根鞘上段及內(nèi)根鞘。當(dāng)毛囊進(jìn)入退化期（P16d），Frizzled4mRNA和蛋白的表達(dá)顯著降低（P<0.05），此時(shí)主要定位于Bugle。而在靜止期，Frizzled4mRNA和蛋白表達(dá)（P<0.05），只有少量Frizzled4陽(yáng)性細(xì)胞出現(xiàn)在毛囊Bulge。免疫熒光技術(shù)檢測(cè)Frizzled4蛋白同樣也在JB6cl30-7b細(xì)胞膜中表達(dá)。MTT結(jié)果顯示與對(duì)照組相比，10μg/mL的抗Frizzled4抗體處理JB6cl30-7b細(xì)胞后光密度值明顯降低（P<0.05），而20μg/mL的抗Frizzled4抗體處理后的光密度值降到（P<0.05）。結(jié)論Frizzled4在毛囊周期中的表達(dá)具有時(shí)空特異性。伴隨著毛囊的生長(zhǎng)，Frizzled4的mRNA和蛋白水平都呈現(xiàn)高表達(dá)，隨著毛囊的退化而表達(dá)降低，直至靜止期維持低表達(dá)水平。拮抗Frizzled4蛋白的作用促使細(xì)胞增殖受到明顯抑制，提示Frizzled4的表達(dá)與毛囊細(xì)胞的增殖和分化相關(guān)。 | ||
驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng)
1、收到小鼠表皮細(xì)胞JB6Cl30-7b細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。
2、收到小鼠表皮細(xì)胞JB6Cl30-7b細(xì)胞，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀(guān)察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀(guān)察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀(guān)察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。
3、收到小鼠表皮細(xì)胞JB6Cl30-7b細(xì)胞后，請(qǐng)鏡下觀(guān)察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到小鼠表皮細(xì)胞JB6Cl30-7b細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況 ，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀(guān)察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過(guò) 80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時(shí)之需。
6、24 小時(shí)后，小鼠表皮細(xì)胞JB6Cl30-7b細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿(mǎn)瓶壁，即可傳代。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般 1-3 分鐘，不超過(guò) 5 分鐘?？梢苑?/span>入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái)，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細(xì)胞 ，懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí)，換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2 培養(yǎng)。
特別提醒： 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請(qǐng)更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。
地址：上海市浦東新區(qū)宏祥北路83號(hào)
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